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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳 已有4人参与

为什么跑琼脂糖电泳时电压总是升不到111V,电流偏高。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): 同意! 2011-11-17 19:42:08
检查一下电泳缓冲液,试试新鲜配制的
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2011-11-15 23:29:45
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2011-11-15 23:29:45:
检查一下电泳缓冲液,试试新鲜配制的

好像机子出问题了,用了新的,而且还用了其他实验室的。哎
3楼2011-11-16 12:49:10
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heroyl

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
应该没关系的,可以跑的吧,我们有时候长时间不换电泳液,电影都降到80了,还是行的,就是比较慢,但是不推荐这样。
实验虐我千百遍,我待实验如初恋
4楼2011-11-17 18:49:34
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
十有八九是电泳缓冲液的问题,建议重新配缓冲液。
电泳时只能选择恒压或者恒流(另一个参数会随着电泳变化)。选择恒压的话,电流会随着电泳逐渐增大。机器有自动保护,当电流超过安全值时,会自动切换回恒流,所以电压就上不去了。
当然也有可能是仪器的安全值设置得太低。虽然不同仪器有差异,不过一般来说,100V的话,电流从60mA到130mA都是可以接受的。检查下仪器参数设置吧。
5楼2011-11-17 19:47:15
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-17 19:47:15:
十有八九是电泳缓冲液的问题,建议重新配缓冲液。
电泳时只能选择恒压或者恒流(另一个参数会随着电泳变化)。选择恒压的话,电流会随着电泳逐渐增大。机器有自动保护,当电流超过安全值时,会自动切换回恒流,所 ...

我把电压设定在90左右,电流75mA左右。
6楼2011-11-17 21:42:45
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by laokuang1988 at 2011-11-17 21:42:45:
我把电压设定在90左右,电流75mA左右。

那就是设置的问题了。

因为电泳体系是不断变化的,所以恒流或者恒压只能选择其一,这个前面也提过了。
一般的电泳仪是这样:你设定了电压和电流2个参数,当使用恒压时,你设定的电流值是允许的最大电流值,超过这个值就会自动切换成恒流,反之亦然。

90V恒压,电流一般在60mA到100mA这个范围吧,你设置成75mA,电泳时很容易就超出了,所以会自动变成恒流。建议你改成140mA(这个值是针对单个电泳槽的,如果你一个电泳仪同时带2个电泳槽,就要加倍,因为仪器是并联的,电流值是叠加的)。

另外我觉得你大可跑100V或者110V,可以缩短电泳时间

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-17 at 21:55 ]
7楼2011-11-17 21:52:12
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-17 21:52:12:
那就是设置的问题了。

因为电泳体系是不断变化的,所以恒流或者恒压只能选择其一,这个前面也提过了。
一般的电泳仪是这样:你设定了电压和电流2个参数,当使用恒压时,你设定的电流值是允许的最大电流 ...

嗯,电流最大是100mA,以前一直跑110V,但是前几天电压上不去,跑了30分钟,缓冲液感觉温温的。
8楼2011-11-17 22:06:03
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by laokuang1988 at 2011-11-17 22:06:03:
嗯,电流最大是100mA,以前一直跑110V,但是前几天电压上不去,跑了30分钟,缓冲液感觉温温的。

你把电流参数设置成140mA吧,用110V跑,缓冲液用新的,这样电流一般在100mA左右。你可以在电泳时观察电流变化,假如新鲜缓冲液,110V恒压,电流还是超过140mA,那你的缓冲液肯定有问题,倒了重新配吧。
9楼2011-11-17 22:09:35
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10楼2012-02-06 16:52:00
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