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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)

[交流] 琼脂糖凝胶电泳 已有4人参与

为什么跑琼脂糖电泳时电压总是升不到111V，电流偏高。
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1楼 2011-11-15 21:56:45
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
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西瓜(金币+1): 同意！ 2011-11-17 19:42:08
检查一下电泳缓冲液，试试新鲜配制的
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2011-11-15 23:29:45
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2011-11-15 23:29:45:
检查一下电泳缓冲液，试试新鲜配制的

好像机子出问题了，用了新的，而且还用了其他实验室的。哎
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3楼2011-11-16 12:49:10
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heroyl

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
应该没关系的，可以跑的吧，我们有时候长时间不换电泳液，电影都降到80了，还是行的，就是比较慢，但是不推荐这样。
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
4楼2011-11-17 18:49:34
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
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十有八九是电泳缓冲液的问题，建议重新配缓冲液。
电泳时只能选择恒压或者恒流（另一个参数会随着电泳变化）。选择恒压的话，电流会随着电泳逐渐增大。机器有自动保护，当电流超过安全值时，会自动切换回恒流，所以电压就上不去了。
当然也有可能是仪器的安全值设置得太低。虽然不同仪器有差异，不过一般来说，100V的话，电流从60mA到130mA都是可以接受的。检查下仪器参数设置吧。
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5楼2011-11-17 19:47:15
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-17 19:47:15:
十有八九是电泳缓冲液的问题，建议重新配缓冲液。
电泳时只能选择恒压或者恒流（另一个参数会随着电泳变化）。选择恒压的话，电流会随着电泳逐渐增大。机器有自动保护，当电流超过安全值时，会自动切换回恒流，所 ...

我把电压设定在90左右，电流75mA左右。
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6楼2011-11-17 21:42:45
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by laokuang1988 at 2011-11-17 21:42:45:
我把电压设定在90左右，电流75mA左右。

那就是设置的问题了。

因为电泳体系是不断变化的，所以恒流或者恒压只能选择其一，这个前面也提过了。
一般的电泳仪是这样：你设定了电压和电流2个参数，当使用恒压时，你设定的电流值是允许的最大电流值，超过这个值就会自动切换成恒流，反之亦然。

90V恒压，电流一般在60mA到100mA这个范围吧，你设置成75mA，电泳时很容易就超出了，所以会自动变成恒流。建议你改成140mA（这个值是针对单个电泳槽的，如果你一个电泳仪同时带2个电泳槽，就要加倍，因为仪器是并联的，电流值是叠加的）。

另外我觉得你大可跑100V或者110V，可以缩短电泳时间

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-17 at 21:55 ]
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7楼2011-11-17 21:52:12
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laokuang1988

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-17 21:52:12:
那就是设置的问题了。

因为电泳体系是不断变化的，所以恒流或者恒压只能选择其一，这个前面也提过了。
一般的电泳仪是这样：你设定了电压和电流2个参数，当使用恒压时，你设定的电流值是允许的最大电流 ...

嗯，电流最大是100mA，以前一直跑110V，但是前几天电压上不去，跑了30分钟，缓冲液感觉温温的。
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8楼2011-11-17 22:06:03
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
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引用回帖:
8楼: Originally posted by laokuang1988 at 2011-11-17 22:06:03:
嗯，电流最大是100mA，以前一直跑110V，但是前几天电压上不去，跑了30分钟，缓冲液感觉温温的。

你把电流参数设置成140mA吧，用110V跑，缓冲液用新的，这样电流一般在100mA左右。你可以在电泳时观察电流变化，假如新鲜缓冲液，110V恒压，电流还是超过140mA，那你的缓冲液肯定有问题，倒了重新配吧。
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9楼2011-11-17 22:09:35
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魏慧芳
顶
10楼2012-02-06 16:52:00
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