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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶电泳关于marker的问题
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liqian901117

新虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳关于marker的问题 已有4人参与

我的marker总是只有第一条带 其他的都很模糊。。。。是什么原因啊 求解。。。。有没有用DL2000的 你们平时用的琼脂糖浓度是多少分离的比较好呀 已经做了好几天了都这个效果额。。。。
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1楼 2014-05-20 15:09:25
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cherish美丽

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liqian901117: 金币+1, ★有帮助 2014-05-21 08:14:29
我用的这个marker, 1%的胶，每次都能清晰的出来五个带啊

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加油，生命是一个长期积累的过程
2楼2014-05-20 15:47:26
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liqian901117

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cherish美丽 at 2014-05-20 15:47:26
我用的这个marker, 1%的胶，每次都能清晰的出来五个带啊

真的？现在试了几次都是前三条分开 后面是一片。。。你有没有你的具体条件或者SOP什么的 给我参考下啊 谢谢啦~
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3楼2014-05-20 16:21:21
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cherish美丽

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liqian901117 at 2014-05-20 16:21:21
真的？现在试了几次都是前三条分开 后面是一片。。。你有没有你的具体条件或者SOP什么的 给我参考下啊 谢谢啦~...

我也是刚接触分子生物，不太懂哦，是不是你的超纯水不好，这挺影响电泳效果的

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加油，生命是一个长期积累的过程
4楼2014-05-21 13:16:28
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芳飞二月

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-22 13:09:40
一个原因可能是电泳液时间久了 离子浓度发生变化，你换新的电泳液试试，也可能是电压不稳，你晚上跑一次试试，晚上电压会稳一点。
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5楼2014-05-21 15:55:43
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-22 13:09:32
有可能是胶配的好、电泳缓冲液太久了、M上样太多而胶比较短跑不开，如果都排除了就是M有问题了。
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6楼2014-05-22 10:55:09
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OlivarD

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查一下你的缓冲液，配胶的和电泳用的
如果有PAGE可以跑着对比，检查一下marker
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7楼2014-05-22 16:16:11
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liqian901117

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by OlivarD at 2014-05-22 16:16:11
检查一下你的缓冲液，配胶的和电泳用的
如果有PAGE可以跑着对比，检查一下marker

发现时染色剂的问题。。。。Gelred不行了。。。
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8楼2014-05-23 14:57:39
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liqian901117

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 夏天的普洱茶 at 2014-05-22 10:55:09
有可能是胶配的好、电泳缓冲液太久了、M上样太多而胶比较短跑不开，如果都排除了就是M有问题了。

Gelred的问题。。。。。
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9楼2014-05-23 14:58:04
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咸鱼~翻身

新虫 (初入文坛)
我用的胶浓度是1.5%的，加样2.5ul，电压160V，8min，基本没条带都清晰。
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10楼2014-07-31 09:37:15
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