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dingcong1216新虫 (小有名气)
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race相关问题 已有2人参与
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| 最近要做race，但是有好多都不太懂，想请教一下各位大侠。我们用的SMART RACE cDNA Amplification kit的方法，但是里面的东西都是师姐之前合成的，其中有10*UPM Long ,10*UPM short ,这个是要两个混合后浓度为long 0.4uM, short 2uM吗？如果要做巢式PCR的话是要先用外侧引物与UPM进行PCR,将产物稀释50倍后再用内侧引物与NUP（Nested Universal Primer A)进行PCR吗？还有3race与 5race的UPM是一样的吗？还有我们之前的反转录是将普通反转录试剂盒takara的RR037A中的oligo dT Primer 与Random 6 mers换成3 race adaptor 后，其余方法与普通反转录一样，做3race的话是按照试剂盒说明书合成cDNA还是和我们之前一样呢？如果有大侠懂的话，希望多多指点。 |
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