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质粒纯化的问题
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lgleek
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
金币: 41
帖子: 2
在线: 41分钟
虫号: 1901499
注册: 2012-07-19
专业: 生物化学
[
求助
]
质粒纯化的问题
已有2人参与
求大神指教!
在提取质粒后,我想要将其中的超螺旋部分纯化出来,但是使用AxyGen试剂盒切胶纯化后,经过核酸胶电泳反而出现了两条带,一条是目的条带,即超螺旋的,一条是在目的条带后面的(疑似解旋),两条一样亮!而且在目的条带前还出现了浅的条带。是不是试剂盒纯化的时候将质粒解旋了?
求指教!如何将实验室制备的质粒纯化出超螺旋状态???
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1楼
2014-07-27 16:37:53
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lgleek
新虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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虫号: 1901499
注册: 2012-07-19
专业: 生物化学
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
luwei13566
at 2014-07-27 18:04:31
回收的超螺旋在后期纯化过程中很容易就开环了,与其后期割胶回收还不如在提质粒的时候注意点。而且提质粒出现的3种状态是很正常的,你想得到完全没有开环和线性的超螺旋质粒非常困难
...
哦哦,好的谢谢!因为实验需要我需要特别纯的超螺旋,怎么办?
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4楼
2014-07-28 14:53:07
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luwei13566
木虫
(正式写手)
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(高中生)
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散金: 97
红花: 35
帖子: 641
在线: 261.1小时
虫号: 2380655
注册: 2013-03-27
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流!
2014-07-27 19:00:46
lgleek: 金币+5,
★★★
很有帮助
2014-07-28 23:00:05
回收的超螺旋在后期纯化过程中很容易就开环了,与其后期割胶回收还不如在提质粒的时候注意点。而且提质粒出现的3种状态是很正常的,你想得到完全没有开环和线性的超螺旋质粒非常困难
[ 发自小木虫客户端 ]
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大家相互帮助哈
2楼
2014-07-27 18:04:31
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鬼羽帝魂
木虫
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(高中生)
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散金: 19
红花: 12
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在线: 186.8小时
虫号: 2538789
注册: 2013-07-09
专业: 生物物理、生物化学与分子
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
质粒纯化可以用CI、PCI抽提啊
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3楼
2014-07-28 10:56:17
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