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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于质粒电泳smear的问题
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majichui

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于质粒电泳smear的问题 已有1人参与

构建的克隆菌，用QIAGEN Hispeed Plasmid midi kit（大约两年前购买的）抽提，抽提后取10ug,用Xbal1 酶切过夜，电泳鉴定。质粒为PUC19插入1000bp片段，用1%琼脂糖胶电泳，上样量为100ng,TAE做缓冲液100V电泳70分钟，Marker从大到小是4500、3000、2250、1500、1000。染色用的是SYBR-GREEN染料，成像时用紫外激发（没有400nm的条件）。
泳道1和3是抽提的质粒；2和4是单酶切后，用天根试剂盒（DNA纯化回收试剂盒）纯化后产物。请问条带模糊的原因？
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    • 2014-04-15 12:53:19, 138.87 K

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1楼 2014-04-15 12:53:40
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成功源于想像

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
majichui(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-18 22:32:49
个人觉得上样量偏大，导致拍照不清晰，整体结果是OK的！
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-18 20:37:05
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