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关于质粒电泳smear的问题已有1人参与
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构建的克隆菌,用QIAGEN Hispeed Plasmid midi kit(大约两年前购买的)抽提,抽提后取10ug,用Xbal1 酶切过夜,电泳鉴定。质粒为PUC19插入1000bp片段,用1%琼脂糖胶电泳,上样量为100ng,TAE做缓冲液100V电泳70分钟,Marker从大到小是4500、3000、2250、1500、1000。染色用的是SYBR-GREEN染料,成像时用紫外激发(没有400nm的条件)。 泳道1和3是抽提的质粒;2和4是单酶切后,用天根试剂盒(DNA纯化回收试剂盒)纯化后产物。请问条带模糊的原因? |
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2014-04-15 12:53:19, 138.87 K
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