[求助] 关于质粒电泳smear的问题已有1人参与

构建的克隆菌，用QIAGEN Hispeed Plasmid midi kit（大约两年前购买的）抽提，抽提后取10ug,用Xbal1 酶切过夜，电泳鉴定。质粒为PUC19插入1000bp片段，用1%琼脂糖胶电泳，上样量为100ng,TAE做缓冲液100V电泳70分钟，Marker从大到小是4500、3000、2250、1500、1000。染色用的是SYBR-GREEN染料，成像时用紫外激发（没有400nm的条件）。
泳道1和3是抽提的质粒；2和4是单酶切后，用天根试剂盒（DNA纯化回收试剂盒）纯化后产物。请问条带模糊的原因？

回复此楼

» 本帖附件资源列表

欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
附件 1 : 111.jpg

2014-04-15 12:53:19, 138.87 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

电泳图片和质粒浓度不相符…… 已经有10人回复
琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA 已经有7人回复
我跑的质粒DNA琼脂糖电泳的图怎么是这样的，什么原因啊已经有15人回复
提取质粒跑电泳后发现在溴酚蓝上面有一团白色的类似条带的东西，求解！！已经有10人回复
小抽之后的质粒DNA凝胶电泳，出现两条或者三条带，为什么？已经有3人回复
双酶切没有切开，怎么回事啊已经有6人回复
质粒酶切之后电泳呈弥散状是什么原因已经有16人回复
大家帮我分析一下质粒电泳图已经有8人回复
质粒PCR后琼脂糖凝胶电泳结果问题已经有7人回复
急求RT-PCR电泳图分析已经有22人回复
求手抽质粒降解原因已经有7人回复
新手求助——质粒电泳条带问题已经有15人回复
求助：为什么线性化的质粒回收之后电泳结果不是一条带已经有11人回复
小提的质粒为什么电泳出现了两条带？已经有7人回复
PCR 总是呈现涂抹状求解答！已经有39人回复
质粒提取琼脂糖电泳的3个条带，到底每条是什么？已经有15人回复
质粒是否需要酶切后再电泳？已经有9人回复
线性化及完整的质粒电泳问题。已经有23人回复
【求助/交流】质粒电泳已经有12人回复
【求助/交流】DNA的琼脂糖凝胶电泳检测已经有9人回复
【求助/交流】质粒电泳中的三条带已经有14人回复

1楼 2014-04-15 12:53:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

成功源于想像

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 21.4
散金: 8
红花: 1
帖子: 114
在线: 29.8小时
虫号: 934853
注册: 2009-12-29
性别: GG
专业: 细胞生理学

【答案】应助回帖

★
majichui(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-18 22:32:49

个人觉得上样量偏大，导致拍照不清晰，整体结果是OK的！

赞一下

回复此楼

2楼2014-05-18 20:37:05