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金虫 (小有名气)

[求助] 小抽之后的质粒DNA凝胶电泳，出现两条或者三条带，为什么？

小抽之后的质粒（空载PIL3.7）DNA凝胶电泳，出现两条带或者三条带，为什么啊，能不能用来做载体？？？
坐等大神解决。。。。谢谢

1楼 2012-11-01 10:52:22

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金虫 (小有名气)

感谢参与，应助指数 +1

很正常啊，因为手提的质粒操作时可能会造成开环甚至线性化，加上原本的超螺旋，就可能出现3条带。你把提好的质粒取少量酶切一下，看看片段大小对不对就好了。

2楼2012-11-01 11:44:38

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铁虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

正常，提完的质粒有三种形式存在：超螺旋闭合环质粒，开口的闭合坏质粒，线性质粒。三者迁移速率不一样，所以会出现三条带。根据你质粒提取的好坏，出现一到三条带都属于正常。你做个酶切检测，如果酶切充分，只有两条带，目的条带和载体的条带。

3楼2012-11-01 11:58:49

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木虫 (正式写手)

感谢参与，应助指数 +1

很正常，不过一般情况都会有一条超螺旋质粒的条带亮度更高，浓度更大，可能与marker相比你的质粒会比理论的小一点，这也是很正常的。正如楼上所说，做个单酶切试试就知道了。

4楼2012-11-01 13:23:22

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