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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于重组菌蛋白表达后镍柱纯化脱盐后的一个问题
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] 关于重组菌蛋白表达后镍柱纯化脱盐后的一个问题 已有3人参与

小虫最近在做蛋白纯化，有个问题想要请教大家
我构建了个重组质粒，在大肠中表达了，使用镍柱纯化之后，采用PD-10脱盐柱脱盐之后，收集到一些纯化后的溶液。我的问题是经过样品经过镍柱纯化和脱盐柱脱盐后，蛋白所处的溶液中包含哪些成分？也就是说是蛋白在缓冲液中还是在水中？请各位解答疑问，谢谢
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我还年轻，我要上路！
1楼 2014-09-25 17:09:54
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
自己顶
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我还年轻，我要上路！
2楼2014-09-26 08:10:25
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ccandcc

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
转基因猴子: 金币+6 2014-09-26 09:37:11
pd10脱盐你用的是什么缓冲溶液，你现在蛋白就是在这个缓冲溶液中
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3楼2014-09-26 08:32:06
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ccandcc at 2014-09-26 08:32:06
pd10脱盐你用的是什么缓冲溶液，你现在蛋白就是在这个缓冲溶液中

对哦，那如果过了镍柱，直接用蛋白超滤管浓缩取出咪唑的话蛋白处在什么环境中呢？
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我还年轻，我要上路！
4楼2014-09-26 09:37:02
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ccandcc

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 转基因猴子 at 2014-09-26 09:37:02
对哦，那如果过了镍柱，直接用蛋白超滤管浓缩取出咪唑的话蛋白处在什么环境中呢？...

那蛋白就是在你的洗出液中啊。
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5楼2014-09-26 16:32:03
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转基因猴子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ccandcc at 2014-09-26 16:32:03
那蛋白就是在你的洗出液中啊。...

我的意思这个洗脱液为什么溶液？

[ 发自小木虫客户端 ]
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我还年轻，我要上路！
6楼2014-09-26 16:34:41
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alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
缓冲液啊 `~~~~~~~~~~~
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修身、齐家、治国、平天下
7楼2014-09-26 22:24:31
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非常6+1

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是处在缓冲液中，就是desalting buffer

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-09-27 14:39:14
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langzian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
脱盐柱说明书上应该有一个洗脱图，它是根据分子筛原理，蛋白比盐的直径大，所以先洗脱，已分离充分时应该有buffer, 蛋白，极微量盐

[ 发自小木虫客户端 ]
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江山
9楼2014-09-28 01:20:24
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