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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] 关于重组菌蛋白表达后镍柱纯化脱盐后的一个问题 已有3人参与

小虫最近在做蛋白纯化,有个问题想要请教大家
我构建了个重组质粒,在大肠中表达了,使用镍柱纯化之后,采用PD-10脱盐柱脱盐之后,收集到一些纯化后的溶液。我的问题是经过样品经过镍柱纯化和脱盐柱脱盐后,蛋白所处的溶液中包含哪些成分?也就是说是蛋白在缓冲液中还是在水中?请各位解答疑问,谢谢
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我还年轻,我要上路!
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langzian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
脱盐柱说明书上应该有一个洗脱图,它是根据分子筛原理,蛋白比盐的直径大,所以先洗脱,已分离充分时应该有buffer, 蛋白,极微量盐

[ 发自小木虫客户端 ]
江山
9楼2014-09-28 01:20:24
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ccandcc

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转基因猴子: 金币+6 2014-09-26 09:37:11
pd10脱盐你用的是什么缓冲溶液,你现在蛋白就是在这个缓冲溶液中
3楼2014-09-26 08:32:06
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ccandcc at 2014-09-26 08:32:06
pd10脱盐你用的是什么缓冲溶液,你现在蛋白就是在这个缓冲溶液中

对哦,那如果过了镍柱,直接用蛋白超滤管浓缩取出咪唑的话蛋白处在什么环境中呢?
我还年轻,我要上路!
4楼2014-09-26 09:37:02
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ccandcc

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 转基因猴子 at 2014-09-26 09:37:02
对哦,那如果过了镍柱,直接用蛋白超滤管浓缩取出咪唑的话蛋白处在什么环境中呢?...

那蛋白就是在你的洗出液中啊。
5楼2014-09-26 16:32:03
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