| 查看: 1148 | 回复: 3 | ||
wushuwei1104银虫 (小有名气)
|
[求助]
关于质粒载体的纯化
|
|
这些天在做质粒的酶切与连接 将目的基因片段双酶切，载体质粒双酶切（37℃水浴2.5小时）后，65℃水浴20分钟终止酶切反应，采用试剂盒纯化双酶切后的目的基因和载体质粒，以便后续的连接实验。问题是酶切完电泳验证目的基因和质粒载体都还存在，可采用试剂盒纯化后目的基因片段依然存在（浓度尚可，略有损失），可载体质粒却不见了。这两个纯化过程是同时进行的，因为怕是操作除了问题，又重新酶切纯化电泳验证一下做了3次，3次都是一样的效果，条带不见了！！！！ 恳请各位大侠分析一下，您做实验时是否出现类似情况，为何会出现这种情况？ 谢谢了！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有193人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 虚心请教关于平—粘末端的连接问题
已经有18人回复
- 质粒DNA提取成了这样，请大家帮忙分析一下
已经有27人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 关于SiRNA表达载体构建的问题
已经有9人回复
- 在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于质粒转化，求高手指导！！（附图）
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于重组质粒的构建，总是失败，希望高手指点一下啊～～
已经有16人回复
- 【求助/交流】关于酶切连接转化的问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于酶切产物连接的一点问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于克隆连接
已经有15人回复
张宏宇123
金虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 388.9
- 帖子: 1084
- 在线: 93.8小时
- 虫号: 1766866
- 注册: 2012-04-20
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2012-05-02 22:15:33
vir2008
木虫 (著名写手)
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 3042.5
- 散金: 260
- 红花: 11
- 帖子: 2713
- 在线: 425小时
- 虫号: 1291297
- 注册: 2011-05-10
- 性别: GG
- 专业: 摩尼教
3楼2012-05-02 23:32:09
wushuwei1104
银虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 433
- 散金: 6
- 红花: 2
- 帖子: 129
- 在线: 27.7小时
- 虫号: 1256891
- 注册: 2011-04-06
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-05-03 07:47:05
