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wushuwei1104银虫 (小有名气)
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[求助]
关于质粒载体的纯化
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这些天在做质粒的酶切与连接 将目的基因片段双酶切，载体质粒双酶切（37℃水浴2.5小时）后，65℃水浴20分钟终止酶切反应，采用试剂盒纯化双酶切后的目的基因和载体质粒，以便后续的连接实验。问题是酶切完电泳验证目的基因和质粒载体都还存在，可采用试剂盒纯化后目的基因片段依然存在（浓度尚可，略有损失），可载体质粒却不见了。这两个纯化过程是同时进行的，因为怕是操作除了问题，又重新酶切纯化电泳验证一下做了3次，3次都是一样的效果，条带不见了！！！！ 恳请各位大侠分析一下，您做实验时是否出现类似情况，为何会出现这种情况？ 谢谢了！！！ |
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