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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒纯化的问题
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lgleek

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒纯化的问题 已有2人参与

求大神指教！
在提取质粒后，我想要将其中的超螺旋部分纯化出来，但是使用AxyGen试剂盒切胶纯化后，经过核酸胶电泳反而出现了两条带，一条是目的条带，即超螺旋的，一条是在目的条带后面的（疑似解旋），两条一样亮！而且在目的条带前还出现了浅的条带。是不是试剂盒纯化的时候将质粒解旋了？
求指教！如何将实验室制备的质粒纯化出超螺旋状态？？？
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1楼 2014-07-27 16:37:53
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-27 19:00:46
lgleek: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-07-28 23:00:05
回收的超螺旋在后期纯化过程中很容易就开环了，与其后期割胶回收还不如在提质粒的时候注意点。而且提质粒出现的3种状态是很正常的，你想得到完全没有开环和线性的超螺旋质粒非常困难

[ 发自小木虫客户端 ]
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大家相互帮助哈
2楼2014-07-27 18:04:31
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒纯化可以用CI、PCI抽提啊
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-07-28 10:56:17
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lgleek

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-27 18:04:31
回收的超螺旋在后期纯化过程中很容易就开环了，与其后期割胶回收还不如在提质粒的时候注意点。而且提质粒出现的3种状态是很正常的，你想得到完全没有开环和线性的超螺旋质粒非常困难
...

哦哦，好的谢谢!因为实验需要我需要特别纯的超螺旋，怎么办？
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4楼2014-07-28 14:53:07
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