| 查看: 5493 | 回复: 34 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
小冀-版主 (著名写手)
|
[求助]
pMD-19T载体与目的片段的连接问题 已有6人参与
|
||
|
之前计划目的基因（3.6Kb）与pMD-19T进行TA克隆连接，目的片段用primerstar高保真酶后加A连接，氨苄板生长，鉴定后发现是载体自连；后来用Taq酶PCR扩增后直接与pMD-19T载体链接，最后发现还是自连的···发现这都不行后就进行一步克隆（ClonExpressTM快速克隆技术），之前认为在载体是线性的，就直接连了，但是没有连上，氨苄平板上没长；后来用以前构建好的质粒进行双酶切后进行一步克隆，可是氨苄平板上还是没有长···各位大神，求助··· 转化条件： 感受态是自己用氯化钙法做的，以前也是用它来做转化，都可以的··· 热击90s后，37℃活化1h后，将转化液浓缩全部涂平板··· |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 重组的景区 |
» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有55人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大片段连接大载体难以连接的问题
已经有20人回复
- pMD19Tsimple如何连接？
已经有8人回复
- 与PMD-19T连接问题
已经有22人回复
- 目的片段和载体连接一直不上
已经有24人回复
- pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
已经有6人回复
- T载体连接不上去
已经有26人回复
- 载体酶切位点与目的片段重复
已经有13人回复
- 片段总是连不到T载体上
已经有22人回复
- 目的片段和T载体连接后PCR条带诡异
已经有16人回复
- 目的片段和pMD18-T simple vector 的连接
已经有20人回复
- T载体连接温度和时间
已经有7人回复
- 目的片段与载体连接后无法检测出
已经有7人回复
- PMD19-T载体连接不上428bp的片段
已经有20人回复
- 高保真酶PCR产物连接pMD-19T载体，DH5a感受态，怎么总是连接不上
已经有26人回复
- pMD-19-T载体的大小是多少啊？
已经有9人回复
- 载体连接pcr片段一直连不上
已经有17人回复
- 关于PCR产物与pMD 19Tsimple连接的问题
已经有19人回复
- 请教关于宝公司pMD18T连接问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】目的片段与载体连接不上
已经有16人回复
- 【求助/交流】PMD18-T载体是什么类型？
已经有5人回复
kuaile5420
专家顾问 (著名写手)
- 应助: 72 (初中生)
- 贵宾: 0.232
- 金币: 10312.4
- 散金: 124
- 红花: 15
- 帖子: 1068
- 在线: 221.8小时
- 虫号: 1836826
- 注册: 2012-05-27
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
- 管辖: 生物医药区
10楼2014-07-25 14:52:32
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2014-07-25 10:20:16
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17218.2
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14535
- 在线: 2187.3小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2014-07-25 11:33:56
kuaile5420
专家顾问 (著名写手)
- 应助: 72 (初中生)
- 贵宾: 0.232
- 金币: 10312.4
- 散金: 124
- 红花: 15
- 帖子: 1068
- 在线: 221.8小时
- 虫号: 1836826
- 注册: 2012-05-27
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
- 管辖: 生物医药区
4楼2014-07-25 11:38:57
20