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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 重组蛋白活性消失。。。

在毕赤酵母X-33中重组表达了一种酶,刚开始测有活性,而且不算低,跑SDS-PAGE分子量跟理论值也差不多,可是甘油管保藏菌种半年之后再做发酵,条件和原来一样,但是却检测不到活性了是怎么回事???经鉴定目的基因还是存在的,有木有遇到类似情况的同学呀,怎么解决的呢?愁死了
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梦想1995

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zdwxxw: 金币+1, 甘油管,-20度 2014-07-18 08:06:24
本帖内容被屏蔽

3楼2014-07-17 12:45:20
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uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zdwxxw: 金币+1, 确定一样,没有什么提取过程,就是直接将发酵液12000g离心取上清测的活力 2014-07-16 14:46:42
确定发酵的条件都一样么?再就是check一下提取过程。
2楼2014-07-16 14:41:10
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uulovelyuu

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-27 20:58:06
重新提取质粒转化一下,最好是测序看看有没有突变。
4楼2014-07-22 16:29:54
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