| 查看: 5742 | 回复: 2 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
zhllhzzhl铜虫 (小有名气)
|
[求助]
求助！WB条带不清楚 已有1人参与
|
|
|
小弟做western blot有段时间了， 最近做小鼠DC细胞 A20的干扰，结果western blot不知怎么了， 第一次做的时候能用抗体砸的出来，但后面重复的时候却总是跑得很脏，条带不清。 请教各位大神，不知是否有遇到这样的情况？还请各位不吝赐教！谢谢啦 PS：1.中间变化的条件主要是转膜条件由100A 50mins 换到100v 60mins，有可能因为转过了么？（100A 50mins 最上2条条带没完全转过来） 2. 由于怀疑是wb中涉及buffer的原因（图2），做过dot plot检验试剂，的确实用的RIPA buffer对抗体有反应， 所以后面用重新配制过，结果还是一样（图三，下面一道为beta-actin，上面模糊的就是我要的条带） 3. A20大约分子量90kd， 但是砸出来的大概只有80kd，这样应该还正常吧？ 4. 为了得到条带，最近增长曝光时间，结果发现在用A20抗体的时候直接砸出了一条大概30+kd的条带 图4（曝光直接先出来的） 5. 有可能是蛋白降解么？ 但是如果是蛋白降解 beta-actin条带也还是很清晰；gel也同时跑了平行样，烤蓝对照排除gel的问题  第一次跑的条带  图2 后面跑的条带 第一道为loding buffer 第二道为marker  图3  图4 |
回复此楼» 猜你喜欢
化工专硕求调剂
已经有3人回复
-
274求调剂
已经有5人回复
-
调剂
已经有3人回复
-
08工学调剂
已经有15人回复
-
招08考数学
已经有16人回复
-
340求调剂
已经有3人回复
-
材料专硕找调剂
已经有4人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有6人回复
-
0805 316求调剂
已经有4人回复
-
0854 考研调剂 招生了！AI 方向
已经有17人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 我的条带小于目的条带。。。求助。。。。
已经有15人回复
- WB扫膜出现背景深且有些条带呈白亮状是怎么回事？
已经有8人回复
- 求助！！！WB内参、抗体的问题。
已经有6人回复
- 求助关于WB的内参问题
已经有3人回复
- WB实验问题求助
已经有9人回复
- P不出来目的条带，求help
已经有4人回复
- WB检测蛋白表达量时关于上样量的问题？
已经有16人回复
- 蛋白异源表达，条带大小不对啊
已经有12人回复
- WB结果杂不出目的条带，只有特别亮的非特异性条带，求高手解释原因
已经有10人回复
- WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？
已经有12人回复
- WB目的条带只看见一片黑，内参清晰可见
已经有7人回复
- WB条带总是不太整齐
已经有6人回复
- 关于WB曝光时发现的问题
已经有4人回复
- WB条带周围黑黑的一团！！！！！
已经有12人回复
- WB条带全出来了· ----各种条带··求分析
已经有12人回复
- WB显影结果分子量漂移
已经有16人回复
- WB检测磷酸化蛋白
已经有41人回复
- WB结果不理想，呼唤帮助
已经有20人回复
- 求助 原核表达WB 多条带
已经有11人回复
- 【求助】WB中，核蛋白内参和总蛋白内参的问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】western blot 缺带 断带
已经有21人回复
- 【求助/交流】WB显影后最后一个条带出现双条带？
已经有4人回复
- 【求助/交流】TBST配方会影响WB结果吗
已经有4人回复
- 【求助/交流】WB老做不出来
已经有6人回复
- 【求助/交流】Western 条带拖尾，有图，望大家帮忙找原因
已经有16人回复
- 【求助/交流】小鼠单抗做WB的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】WB电泳条带窄 但颜色深
已经有5人回复
- 【求助/交流】PCR条带不清楚
已经有11人回复
zhllhzzhl
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 250.5
- 散金: 502
- 帖子: 203
- 在线: 11小时
- 虫号: 1766430
- 注册: 2012-04-19
- 性别: GG
- 专业: 纳米医学
3楼2014-07-07 08:17:36
biotech_zhou
木虫 (著名写手)
待人以诚：专业/专注/专心
- 应助: 373 (硕士)
- 金币: 2037.6
- 散金: 206
- 红花: 6
- 帖子: 1441
- 在线: 317.6小时
- 虫号: 3078402
- 注册: 2014-03-21
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
2楼2014-07-03 10:02:04
