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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌液提不出质粒来，求帮分析。
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 菌液提不出质粒来，求帮分析。 已有1人参与

载体+片段总共  13880  bp左右，第一次转化后生长正常，提质粒18个都没提出来，没有带。并且用碱裂解提质粒时，加入溶液2混匀后，溶液变的非常澄清。     第二次一样的连接体系，转化后没有长 单克隆。
求分析:质粒提不出来是什么原因？    第二次是什么因素导致没长单克隆？
谢谢。
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1楼 2014-06-18 15:07:32
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-19 10:49:31
好的   我看看 谢谢    不过我一直用的碱裂解    提的量还可以...

不用客气
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-19 12:21:56
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-18 22:13:26
鬼羽帝魂: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-19 10:49:43
我们用的是10mg/ml的溶菌酶提取的，加入25ul即可，方便快捷，楼主不妨试试。

参考资料：
下载：
中文版上册：http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
中文版下册：http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
英文版：http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-18 20:06:11
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-18 20:06:11
我们用的是10mg/ml的溶菌酶提取的，加入25ul即可，方便快捷，楼主不妨试试。

参考资料：
下载：
中文版上册：http://pan.baidu.com/share/link?shareid=291066529&uk=1309447823
中文版下册：http://pan. ...

好的   我看看 谢谢    不过我一直用的碱裂解    提的量还可以
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3楼2014-06-19 10:49:31
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sh_9153

银虫 (小有名气)
第二次没有克隆是否证明没有连接上，第一次或者是杂菌污染，或者是抗生素失效，考虑一下这一方面
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5楼2015-04-10 16:28:06
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