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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 菌液提不出质粒来,求帮分析。 已有1人参与

载体+片段总共  13880  bp左右,第一次转化后生长正常,提质粒18个都没提出来,没有带。并且用碱裂解提质粒时,加入溶液2混匀后,溶液变的非常澄清。     第二次一样的连接体系,转化后没有长 单克隆。
求分析:质粒提不出来是什么原因?    第二次是什么因素导致没长单克隆?
谢谢。
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-19 10:49:31
好的   我看看 谢谢    不过我一直用的碱裂解    提的量还可以...

不用客气
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
4楼2014-06-19 12:21:56
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-18 22:13:26
鬼羽帝魂: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-06-19 10:49:43
我们用的是10mg/ml的溶菌酶提取的,加入25ul即可,方便快捷,楼主不妨试试。

参考资料:
下载:
中文版上册:http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
中文版下册:http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
英文版:http://pan.baidu.com/share/link? ... p;amp;uk=1309447823
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-18 20:06:11
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-06-18 20:06:11
我们用的是10mg/ml的溶菌酶提取的,加入25ul即可,方便快捷,楼主不妨试试。

参考资料:
下载:
中文版上册:http://pan.baidu.com/share/link?shareid=291066529&uk=1309447823
中文版下册:http://pan. ...

好的   我看看 谢谢    不过我一直用的碱裂解    提的量还可以
3楼2014-06-19 10:49:31
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sh_9153

银虫 (小有名气)

第二次没有克隆是否证明没有连接上,第一次或者是杂菌污染,或者是抗生素失效,考虑一下这一方面
5楼2015-04-10 16:28:06
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