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andyffcc

银虫 (初入文坛)

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[求助] 荧光定量PCR中，结果内参基因的CT值有，但是目的基因的CT值没有，怎么办已有5人参与

请教各位，最近在做qRT-PCR，内参选的是18s，结果发现，内参的CT值有，但是目的基因的CT值没有。PCR程序的循环是34，内参的CT值到20几了，最高都达到30了，好像高了点，因为之前做的都只有十几左右，目的基因的CT值干脆就没了，是不是模板的浓度太低了，（ps：我的反转录产物是稀释过再用的），是不是通过增加模板量就可以，还是有没有其他有问题的地方呢，请各位指教一下，谢谢！

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1楼 2014-06-08 22:52:20

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necrosis

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2014-06-10 08:21:29
还有可能是引物设计不合理，我有一次做的也是目的基因压根就没有表达，可以考虑换引物试试。

...

你好，请问你是如何判断目的基因没有表达？和阴性对照对比吗？

7楼2015-02-13 13:47:15

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