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lvsunjian

新虫 (小有名气)

[交流] His标签蛋白纯化后,有杂带已有6人参与

菌液诱导表达过夜后,用PBS悬浮细胞,超声破碎。
离心后取上清液上柱(生工的柱子)。
用10ml, Ni-Native-0平衡;
上样;
再用5ml, Ni-Native-20洗脱,得到3管样品;
接下来用5ml, Ni-Native-250洗脱,得到4管样品;
结果如下:
Marker,阴性对照,阳性对照,N20-1,N20-2,N20-3,N250-1,N250-2,N250-3,N250-4,没管收集1ml。
我想知道,杂蛋白是如何去除的?是通过低浓度的Ni-Native逐步洗脱的还是?
用Ni-Native-0,20,50,100,250,我怕把样品都洗脱没了~

His标签蛋白纯化后,有杂带
1.jpg
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