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[交流]
His标签蛋白纯化后，有杂带 已有6人参与
菌液诱导表达过夜后，用PBS悬浮细胞，超声破碎。
离心后取上清液上柱（生工的柱子）。
用10ml, Ni-Native-0平衡；
上样；
再用5ml, Ni-Native-20洗脱，得到3管样品；
接下来用5ml, Ni-Native-250洗脱，得到4管样品；
结果如下：
Marker，阴性对照，阳性对照，N20-1，N20-2，N20-3，N250-1，N250-2，N250-3，N250-4，没管收集1ml。
我想知道，杂蛋白是如何去除的？是通过低浓度的Ni-Native逐步洗脱的还是？
用Ni-Native-0，20，50，100，250，我怕把样品都洗脱没了~
![His标签蛋白纯化后，有杂带]()
1.jpg |
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