应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 配SDS-PAGE蛋白胶，分离胶凝，但是浓缩胶怎么都不凝怎么回事？
511/6返回列表123456下一页
查看: 9225  |  回复: 50
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

张冰宝

新虫 (小有名气)

[求助] 配SDS-PAGE蛋白胶，分离胶凝，但是浓缩胶怎么都不凝怎么回事？ 已有18人参与

最近在做蛋白电泳，配SDS-PAGE时分离胶可以凝，但是浓缩胶怎么都不凝，尝试了各种办法，重新配AP,SDS,丙烯酰胺，tris-hcl 8,8 和tris-hcl6,8.确定药品都没有过期，分离胶凝的很快，浓缩胶怎么都不凝，已经试过n多次了。。恳请了解的大侠们给找找原因，万分感谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-18 19:48:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

刘堃

金虫 (正式写手)
配置堆积胶之前，你确定试剂量没加错？天气还不是太热，配胶前要把试剂稍微加热一下，不要有结晶出现；加入一种催化剂之后一定要充分摇匀后再加另一种催化剂。可以放在30摄氏度左右的培养箱中，切记温度不可太高。
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2014-04-19 19:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
遥想当年，怎么把SDS-PAGE搞凝了，也是我的主要困惑。哈哈。

凭直觉，我建议你检查一下，你用的水，是水么？

是不是把封胶的异丙醇当水用了？？闻一下你的胶？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-04-18 21:28:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很大原因是温度，放到37℃培养箱，要是还不凝，就是试剂问题了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-04-19 09:16:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
46楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-02 07:13:06
如果你所stacking和resolving的所有材料，除了两个buffer以外都是一样的，那还是你哪步做错了，再重新细细做一次看看，同时让别人做一组，做对照

感谢各位大侠，原因找到了是我们实验室的水出了问题，水偏酸性。导致其不凝。
赞一下(1人) 回复此楼
47楼2014-05-06 08:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

张冰宝

新虫 (小有名气)
我确定是水的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
3楼2014-04-18 21:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张冰宝

新虫 (小有名气)
恳请懂得的大侠帮帮忙，救急啊
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-19 08:32:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by silicare at 2014-04-19 09:16:52
很大原因是温度，放到37℃培养箱，要是还不凝，就是试剂问题了

放温箱培养了，浓缩胶不凝。试剂都是新配的，确定AP没有潮解，sds和tris都是新买的试剂。TEMED没有问题，不然分离胶也不会凝。丙烯酰胺都是按照说明书重新配的。。浓缩胶就是不凝。师姐半个月之前还配了蛋白胶，没出现这种问题。希望大家能帮出出主意，万分感谢
赞一下 回复此楼
6楼2014-04-19 10:51:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 刘堃 at 2014-04-19 19:10:17
配置堆积胶之前，你确定试剂量没加错？天气还不是太热，配胶前要把试剂稍微加热一下，不要有结晶出现；加入一种催化剂之后一定要充分摇匀后再加另一种催化剂。可以放在30摄氏度左右的培养箱中，切记温度不可太高。

试剂不会加错的，这个配胶的过程我已经做了n多次，并且师姐也帮着做了很多次，放在温箱 ，阳光下浓缩胶都不凝，分离胶凝的很快，tris-hcl也重新配了三次确定没有问题。
赞一下 回复此楼
8楼2014-04-20 16:18:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apeterson

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的建议是换个人帮你配一下，如果这个人也出现这个问题，那么你需要重视一下，如果他做出来了，就说明你习惯性的操作了一步错误，这种情况有可能的，当一个人总是做错实验的话 其实不过是陷入死循环了，清醒一下就好了
赞一下 回复此楼
考研奋斗中····
9楼2014-04-21 01:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

worgjin

木虫 (小有名气)
你确认配方没有错？多找几个来源看看
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-21 10:30:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 张冰宝 的主题更新
511/6返回列表123456下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-16 07:12 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:15 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-16 04:23 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:38 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:23 by DgNGHc3h5tPl
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:59 by zNcEhTcH7ihq
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:59 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:15 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:50 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:35 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:13 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-15 14:10 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 09:38 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭