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张冰宝

新虫 (小有名气)

[求助] 配SDS-PAGE蛋白胶,分离胶凝,但是浓缩胶怎么都不凝怎么回事? 已有18人参与

最近在做蛋白电泳,配SDS-PAGE时分离胶可以凝,但是浓缩胶怎么都不凝,尝试了各种办法,重新配AP,SDS,丙烯酰胺,tris-hcl 8,8 和tris-hcl6,8.确定药品都没有过期,分离胶凝的很快,浓缩胶怎么都不凝,已经试过n多次了。。恳请了解的大侠们给找找原因,万分感谢
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张冰宝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 刘堃 at 2014-04-19 19:10:17
配置堆积胶之前,你确定试剂量没加错?天气还不是太热,配胶前要把试剂稍微加热一下,不要有结晶出现;加入一种催化剂之后一定要充分摇匀后再加另一种催化剂。可以放在30摄氏度左右的培养箱中,切记温度不可太高。

试剂不会加错的,这个配胶的过程我已经做了n多次,并且师姐也帮着做了很多次,放在温箱 ,阳光下浓缩胶都不凝,分离胶凝的很快,tris-hcl也重新配了三次确定没有问题。
8楼2014-04-20 16:18:22
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查看全部 51 个回答

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
遥想当年,怎么把SDS-PAGE搞凝了,也是我的主要困惑。哈哈。

凭直觉,我建议你检查一下,你用的水,是水么?

是不是把封胶的异丙醇当水用了??闻一下你的胶?
2楼2014-04-18 21:28:47
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张冰宝

新虫 (小有名气)

我确定是水的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-04-18 21:49:18
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张冰宝

新虫 (小有名气)

恳请懂得的大侠帮帮忙,救急啊
4楼2014-04-19 08:32:17
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