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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 配SDS-PAGE蛋白胶，分离胶凝，但是浓缩胶怎么都不凝怎么回事？
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
38楼: Originally posted by 畅跑daily at 2014-04-28 15:22:27
我们现在的浓缩胶可以凝，但它就是凝不成型，不会像分离胶那样，可以成型，不知道对实验有影响没有！
...

凝不成形是不是没有混匀呢，多吹打几次看看。一般我都是吹打20次左右
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41楼2014-04-29 08:08:41
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
27楼: Originally posted by 言语sky at 2014-04-25 11:09:43
这个~~~只要按照配方配肯定没问题的~~~~你再好好看看你的配方，应该是什么地方出错了~~我原来做的时候没出现过，有时候实验室温度高点的话，就去别的温度相对低点的实验室做胶，或许是你的实验室的温度过高

我想问一下，如果我用的dd水PH 有点低，那么我用氢氧化钠把PH调到中性，这样会不会有影响？会不是想想跑胶的效果，毕竟多了一些离子。
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42楼2014-04-29 08:28:34
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张冰宝

新虫 (小有名气)
各位大侠，d经过一阶段的找原因，现在发现我们实验室所用的水（压过的）PH值偏低，大概在5.5左右正常应该在7左右，所以尝试了用氢氧化钠将水PH值调到7.结果虽然浓缩胶凝固了，但是不知道加入的氢氧化钠是否影响跑胶，？？不知道是否加入的氢氧化钠在改变水的同时也间接的改变了tris-hcl6.8的PH值促使其凝固？希望了解的大侠能够多多帮忙，看一下这样是否可行
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43楼2014-04-29 14:53:43
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biology-boy

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
44楼2014-04-29 20:00:40
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
44楼: Originally posted by biology-boy at 2014-04-29 20:00:40
其实 总是不凝固的话 可以考虑多加，你把原来的量加倍 或者变成几倍 你再试试。

都试过的，成倍加大量都不凝固。。。
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45楼2014-04-30 08:37:19
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meng_xu

铜虫 (小有名气)
如果你所stacking和resolving的所有材料，除了两个buffer以外都是一样的，那还是你哪步做错了，再重新细细做一次看看，同时让别人做一组，做对照
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46楼2014-05-02 07:13:06
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张冰宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
46楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-02 07:13:06
如果你所stacking和resolving的所有材料，除了两个buffer以外都是一样的，那还是你哪步做错了，再重新细细做一次看看，同时让别人做一组，做对照

感谢各位大侠，原因找到了是我们实验室的水出了问题，水偏酸性。导致其不凝。
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47楼2014-05-06 08:08:01
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畅跑daily

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们的现在可以了，原来我们的浓缩胶浓度是3.5%，现在把它的浓度提高了，问题解决了
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48楼2014-05-26 18:55:06
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卡卡小西

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
47楼: Originally posted by 张冰宝 at 2014-05-06 08:08:01
感谢各位大侠，原因找到了是我们实验室的水出了问题，水偏酸性。导致其不凝。...

我也遇到了跟你同样的问题，分离胶凝，浓缩胶不凝，我查了一下我们科用的去离子水，发现PH都到8.2了，这会是我浓缩胶不凝的原因吗，求大神们指点
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49楼2015-07-10 10:09:04
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1405981468a

新虫 (初入文坛)
请问你的浓缩胶问题解决了么，我也遇到了和你一样的问题，不知道怎么办
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50楼2015-08-05 14:39:43
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