24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 6877  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物,只有引物二聚体,,怎么办已有10人参与

小妹已经做了多次基因组DNAPCR,每次扩增出来的只有引物二聚体,连目标条带都没有,我设置的pcr参数是:
F1:2ul
F2:2ul
DNA模板:2ul
PCR Mix:25ul
ddH2O:19ul
两条引物的Tm分别是70.7、64.4,我设的PCR的Tm是60,扩增出来只有引物二聚体.又用60的退火温度做了一次,还是只有引物二聚体,怎么办
,
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by for5 at 2014-04-16 18:11:55
温度继续降,直到p出来为止。或者设一个touchdown的程序,设一个初始温度,一个降低温度以及一个终点温度

买的PCR仪不能设置温度梯度,我用65,60 的退火温度,温度继续降,是为什么呢
7楼2014-04-16 20:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

for5

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-16 19:19:07
温度继续降,直到p出来为止。或者设一个touchdown的程序,设一个初始温度,一个降低温度以及一个终点温度

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
操蛋的XX
2楼2014-04-16 18:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士

帮顶,blessing, blessing, blessing ! ~~~
4楼2014-04-16 18:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
韩元富豪: 金币+1 2014-04-17 21:38:41
我感觉你还是从引物特异性分析,其次再筛选退火温度。退火温度不一定非得低于TM值5度以下,为什么不从较低的那个TM值开始呢?
学习使你立于不败之地
5楼2014-04-16 20:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见