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dalaoguo8264

金虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大虫,我的SDS-PAGE跑出来的Actin,诡异 已有3人参与

用的是DAB显色法,怎么会跑 出这样诡异的图片,实验室的同学都没见过

求助各位大虫,我的SDS-PAGE跑出来的Actin,诡异
1.jpg
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dalaoguo8264

金虫 (小有名气)

我用的是5%的浓缩胶,12%的分离胶,上样量15μl,电泳开始时电压80V,跑了1h,然后调到160V,大约50min。
我用同学的1年前的蛋白样跑出来就不错
求助各位大虫,我的SDS-PAGE跑出来的Actin,诡异-1
6.jpg

4楼2014-03-21 14:19:01
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查看全部 13 个回答

2008liulin

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
若Actin 为42 你的Marker显示在 40 50 之间,则,一抗有问题了,降解,请新配抗体实验。
2楼2014-03-21 14:10:03
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dalaoguo8264

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 2008liulin at 2014-03-21 14:10:03
若Actin 为42 你的Marker显示在 40 50 之间,则,一抗有问题了,降解,请新配抗体实验。

我用了其他同学的1年前的蛋白样品,跑出来的还不错,考虑是不是我的蛋白出了问题
3楼2014-03-21 14:15:03
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
dalaoguo8264: 金币+1, 有帮助 2014-03-21 14:55:07
蛋白没提好,样品是什么材料,脂肪多貌似也会造成这样,
多情总被无情扰。。。愁
5楼2014-03-21 14:33:18
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