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大片段的载体连接，急 已有1人参与
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最近在做基因回补，可能是回补的基因太大了，载体一直都构不出来。基因有近7K，一起做的有5.3K的连上了。试过4度过夜，16度过夜，22度过夜，都不行。DNA量定量的，片段：载体摩尔比 7:1. 涂板后 不是不长，长得少，挑的时候倒也挺像是勾出来的，扩目标带有弱带，但一提质粒检测，质粒的大小根本没变化，挑了100多个了都是假阳性。连接酶是fermatas的快速连接酶，质粒5K。 检测目标基因的图.png  提质粒后单酶切 酶切.png |
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jiajiav1991
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2楼2014-09-05 07:37:08