24小时热门版块排行榜    

查看: 1048  |  回复: 1

xjldemon

新虫 (初入文坛)

[求助] 大片段的载体连接,急 已有1人参与

最近在做基因回补,可能是回补的基因太大了,载体一直都构不出来。基因有近7K,一起做的有5.3K的连上了。试过4度过夜,16度过夜,22度过夜,都不行。DNA量定量的,片段:载体摩尔比 7:1.     涂板后  不是不长,长得少,挑的时候倒也挺像是勾出来的,扩目标带有弱带,但一提质粒检测,质粒的大小根本没变化,挑了100多个了都是假阳性。连接酶是fermatas的快速连接酶,质粒5K。

大片段的载体连接,急
检测目标基因的图.png


大片段的载体连接,急-1
提质粒后单酶切 酶切.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiajiav1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

提的质粒是多少浓度的?浓度过小连接效率低,浓度过大单酶切可能不完全,所以掌握好浓度是比较重要的。
我不想站得多高,看得多远,只想做好手上的每一件事。
2楼2014-09-05 07:37:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xjldemon 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂 +10 人间唯你是清欢 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:33 by hypershenger
[考研] 285求调剂 +9 满头大汗的学生 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:29 by hypershenger
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +9 吃宵夜1 2026-02-28 11/550 2026-03-02 20:14 by hypershenger
[考研] 中国科学技术大学材料与化工281求调剂,有科研和获奖经历 +5 wsxw 2026-03-02 5/250 2026-03-02 20:12 by hypershenger
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 化工270求调剂 +9 什么名字qwq 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:31 by caszguilin
[考研] 求调剂 +10 yunziaaaaa 2026-03-01 11/550 2026-03-02 19:17 by caszguilin
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 化工京区271求调剂 +6 11ing 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:52 by caszguilin
[考研] 一志愿山东大学材料与化工325求调剂 +5 半截的诗0927 2026-03-02 5/250 2026-03-02 18:37 by 明亮9527
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +4 awaystay 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:33 by yeahyou
[考研] 303求调剂 +5 今夏不夏 2026-03-01 5/250 2026-03-02 15:01 by 向上的胖东
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见