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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌落PCR有目的条带，重组质粒提取PCR却没条带，请问是什么原因？
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR有目的条带，重组质粒提取PCR却没条带，请问是什么原因？已有3人参与

菌落PCR有目的条带，重组质粒PCR却没条带，然后提取质粒跑电泳，也没观察到重组之后大小的目的条带，有很多杂带，请问可能是什么原因啊？
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1楼2014-03-20 15:54:30
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-21 08:56:00
菌落PCR时有污染，重新筛一下，多选几个阳性菌提质粒验证。
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hehe
3楼2014-03-20 19:34:01
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1057910381

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-21 08:55:56
使用菌液PCR吧，你转化时的DNA可能占到长得菌落上了，所以PCR时可能会有条带
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2楼2014-03-20 18:20:54
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1057910381 at 2014-03-20 18:20:54
使用菌液PCR吧，你转化时的DNA可能占到长得菌落上了，所以PCR时可能会有条带

哦，谢谢啦，再去试试。
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4楼2014-03-21 09:11:44
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-20 19:34:01
菌落PCR时有污染，重新筛一下，多选几个阳性菌提质粒验证。

说道污染想起来了，可能是质粒转化感受态的时候无菌操作没做好。再重来一遍试试。谢谢。
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5楼2014-03-21 09:13:58
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