| 查看: 1185 | 回复: 3 | ||
[求助]
PCR引物一大堆CG，跪求大神们支招已有1人参与
|
| 我用PET-28a载体，设计的引物序列是TTAGGATCC---ATGTGCGAGCCCGGGGACATTAC，这是mRNA,在各种数据里都找不到ATG前面的序列，用这个作为上游引物能不能P出来呀？还有其他的什么办法能把这发夹解开吗？跪求…………急…………谢谢各位大侠！ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有243人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
PCR引物设计问题，求教大神~
已经有11人回复- PCR引物二聚体问题
已经有12人回复
- 重叠PCR引物，两个片段分别回收后存在杂带是怎么回事
已经有4人回复
- PCR引物之NcoI的问题
已经有11人回复
- rt-pcr图，请大神们帮助分析一下，急。。。谢谢。。。
已经有20人回复
- ISSR-PCR的引物问题是只用1条？
已经有9人回复
- 重叠延伸PCR引物合成求助
已经有15人回复
- 寻找好心人，帮帮我，关于引物以及PCR的问题！
已经有7人回复
- PCR引物的量如何确定，求助高手指教
已经有11人回复
- realtimePCR引物
已经有11人回复
- 帮忙评价一下PCR引物
已经有11人回复
- 全质粒PCR引物设计
已经有9人回复
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- PCR引物扩增的问题
已经有5人回复
- 如何设计重叠延伸PCR引物
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR只有引物二聚体，有图
已经有20人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 【求助/交流】请教各位一个定量PCR引物设计的问题，谢谢啦
已经有3人回复
- 【分享】免费共享----Real-Time PCR引物，从老鼠到人，应有尽有
已经有28人回复
tu475575025
新虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 416.1
- 红花: 2
- 帖子: 70
- 在线: 41小时
- 虫号: 2003636
- 注册: 2012-09-15
- 专业: 生物信息学
2楼2014-03-20 15:31:26
3楼2014-03-21 16:37:09
tu475575025
新虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 416.1
- 红花: 2
- 帖子: 70
- 在线: 41小时
- 虫号: 2003636
- 注册: 2012-09-15
- 专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-03-22 22:40:39
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-03-22 22:40:39
|
给你出个主意： 1、设计一对有突变的引物，5端带上你要的GC，发夹结构处适当突变一两个碱基，3端再多加几个互补碱基，这个就避免了发夹结构，应该是可以p出来，但是p出来的基因读码可能应为一两个碱基的突变而出错（如果你考虑一下密码子，看有没可能设计无义突变来避免发夹）； 2、然后就是用你现在的引物以上一轮突变的产物做模板来扩增，特异性肯定很高（除了你突变的一两个碱基，都能完全互补） ps：用简单的模板（质粒、纯化的pcr产物）可以减少错配，不用复杂的。 同是被实验虐，这是我的经验，祝成功！ |
4楼2014-03-22 19:51:16