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焦卓磊

铁虫 (正式写手)

[求助] 融合PCR扩增不出目的条带

如题,小弟是要做三个片段的融合PCR,最后的目的片段大约是4.5kb,有两段比较好融合可以扩增出目的条带,但是三个一融合扩增,或者其他的两个融合的话,扩增条带就变得弥散,或者扩增出1KB左右大小的条带,木有目的带~
扩了十多天的PCR满满的都是血泪啊!酶我也从prime star换成Ex tag,也没啥效果,我也退火温度做了梯度,依旧是无果~
求大神指点方向,我还可以改变那些条件,来进行PCR 扩增~
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xujialing

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小王叨叨 at 2015-12-08 13:07:52
不知道楼主当年做的如何了?问题是怎么解决的呢?我现在也在做三个片段的融合 也是要不没有条带 要不就是弥散条带,有一次大小对了 然后用融合的片段再P就P不出来了 不知道什么问题啊?求指导

同,目的条带p再p不出来了
4楼2018-05-18 10:05:40
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liu208xj

金虫 (正式写手)

写详细点,最好附上胶图。
2楼2014-03-05 11:01:44
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小王叨叨

新虫 (初入文坛)

不知道楼主当年做的如何了?问题是怎么解决的呢?我现在也在做三个片段的融合 也是要不没有条带 要不就是弥散条带,有一次大小对了 然后用融合的片段再P就P不出来了 不知道什么问题啊?求指导
3楼2015-12-08 13:07:52
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