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菜菜0929

木虫 (小有名气)

[求助] ???怎么克隆已经知道了一段序列的基因比较简单 已有1人参与

我想克隆几个基因,分别已知一段序列,已知的序列200bp-2000bp,是转录组测序得到的,现在要克隆,什么方法最简单?
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-21 09:29:00
你试着用这些片段在网上搜索,测序物种近缘的几个物种的EST序列拼接成长片段,根据保守性较高的片段设计引物。或者你利用你获得的片段克隆gDNA再做 Race。
hehe
2楼2014-01-20 21:55:53
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菜菜0929

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-20 21:55:53
你试着用这些片段在网上搜索,测序物种近缘的几个物种的EST序列拼接成长片段,根据保守性较高的片段设计引物。或者你利用你获得的片段克隆gDNA再做 Race。

怎么克隆gDNA呢?拿我测序得到的序列直接设计引物,扩增出一个片段,然后3'和5'吗?我们课题组有人测序得到EST序列,是我说的这样做的,我也可以这样做吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
你所浪费的今天是昨天死去的人所奢望的明天,你所厌恶的现在是你回不去的曾经,活在当下
3楼2014-01-21 00:44:25
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