24小时热门版块排行榜    

查看: 1104  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

qin.xiaoyue

铁虫 (初入文坛)

[求助] TAIL-PCR的相关问题 已有2人参与

我用的载体是根据pPZPY122载体改造的,称为pF3PZPY122,不知道其具体载体序列。做TAIL-PCR时用的方法是根据Fusion primer and nested integrated PCR
(FPNI-PCR): a new high-efficiency strategy for rapid chromosome walking or flanking sequence cloning文献报道的FPNI-PCR方法。特异引物的设计是根据pPZPY122载体序列靠近RB区域设计的向外扩增的引物,经过3轮PCR之后得到了1000bp左右很特异的条带,但是测序却得到了RB上游的载体上的序列(距离RB约2K),有人遇到过相同的情况吗?求大神帮忙。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qin.xiaoyue

铁虫 (初入文坛)

好的,非常感谢!但是应该怎样设计呢?我设计的是靠近RB区域的,要从中间设计吗?
3楼2014-01-10 20:57:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-10 23:22:40
tail pcr经常出现扩出的片段是已知片段内序列,建议你再设计一些特异引物再做一次。
hehe
2楼2014-01-10 17:04:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马里奥的夏天

新虫 (初入文坛)

我也想做这个实验,请问随机引物是自己设计的还是按照那篇文献上合成的,希望能请教一下。
4楼2014-07-07 19:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liluocheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主你好,请问你有pF3PZPY122载体的图谱么,能发给我一份么,拜托拜托!
5楼2019-11-19 16:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学280分求调剂 +4 722865 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:01 by chixmc
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +4 谷雨上岸 2026-03-23 5/250 2026-03-23 21:18 by 不惑可乐
[考研] 265求调剂 +10 梁梁校校 2026-03-17 10/500 2026-03-23 21:17 by 一切OK
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +7 生物工程调剂 2026-03-17 12/600 2026-03-23 18:18 by YMU施老师
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-17 10/500 2026-03-23 13:05 by 醉在风里
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
请填处理意见