我用的载体是根据pPZPY122载体改造的，称为pF3PZPY122，不知道其具体载体序列。做TAIL-PCR时用的方法是根据Fusion primer and nested integrated PCR
(FPNI-PCR): a new high-efficiency strategy for rapid chromosome walking or flanking sequence cloning文献报道的FPNI-PCR方法。特异引物的设计是根据pPZPY122载体序列靠近RB区域设计的向外扩增的引物，经过3轮PCR之后得到了1000bp左右很特异的条带，但是测序却得到了RB上游的载体上的序列（距离RB约2K），有人遇到过相同的情况吗？求大神帮忙。
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