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TAIL-PCR的相关问题 已有2人参与
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我用的载体是根据pPZPY122载体改造的,称为pF3PZPY122,不知道其具体载体序列。做TAIL-PCR时用的方法是根据Fusion primer and nested integrated PCR (FPNI-PCR): a new high-efficiency strategy for rapid chromosome walking or flanking sequence cloning文献报道的FPNI-PCR方法。特异引物的设计是根据pPZPY122载体序列靠近RB区域设计的向外扩增的引物,经过3轮PCR之后得到了1000bp左右很特异的条带,但是测序却得到了RB上游的载体上的序列(距离RB约2K),有人遇到过相同的情况吗?求大神帮忙。 |
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lvbobo823
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