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可乐galaxy

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 如何用PCR做定点突变和敲除已有3人参与

有哪位大神能和我详细讲下怎么用PCR去做敲除和定点突变，引物该怎么去设置，步骤和原理是怎么样。本人进的实验室属于新建实验室，很多都要靠自学，所以麻烦详细讲下，不甚感激，而且考试还得考。。。。

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1楼 2014-01-04 20:28:20

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starseacow

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-05 09:58:15

给实验室搞得软件做个广告，如果打算用PCR做点突变，引物可以用SDM-Assist设计。
http://psrg.org.uk/sdm-assist/

Karnik A, Karnik R and Grefen C: SDM-assist software to design site-directed mutagenesis primers introducing “silent” restriction sites. BMC Bioinformatics 2013, 14:105; DOI: 10.1186/1471-2105-14-105