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明月无心

铜虫 (初入文坛)

[求助] 本人最近在做定点突变相关内容，求部分重叠引物设计方法

本人最近在做定点突变相关内容，求部分重叠引物设计方法？谢谢各位大侠！Sample Text
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1楼 2012-10-15 16:52:56
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ypan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol，里面很详细。
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明月无心
2楼2012-10-15 17:45:25
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ypan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-16 17:08:55
引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol，里面很详细。

stratagene公司的点突变还是非常有名的。
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3楼2012-10-15 17:45:51
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-10-16 17:09:08
对的，赞成楼上的，建议你去买stratagene mutagenesis，他们家有单点和多点突变的试剂盒，操作很简单，而且引物设计也不麻烦，就是你想要的目的片段的正确序列就行。
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4楼2012-10-15 21:17:09
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明月无心

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol，里面很详细。

谢谢了
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5楼2012-10-16 11:11:22
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明月无心

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 水寒冰006 at 2012-10-15 21:17:09
对的，赞成楼上的，建议你去买stratagene mutagenesis，他们家有单点和多点突变的试剂盒，操作很简单，而且引物设计也不麻烦，就是你想要的目的片段的正确序列就行。

谢了
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6楼2012-10-16 11:20:41
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bio-research

金虫 (职业作家)
★
1949stone: 金币+1, 感谢关注- 2012-10-16 17:09:29
重叠PCR设计有没有一些原则？
比如重叠部分为多个对碱基为宜？与模板配对部分又多少对为宜？我看到有些论文设计的引物与模板重叠才８对碱基？可行吗？
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家有小子初长成!(Nothing is impossible to a willing heart!)
7楼2012-10-16 12:40:35
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

印象里面stratagene的好像是要20-30个左右吧，说明书里面有写，已经n久不做了，呵呵
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8楼2012-10-16 17:03:11
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沧海一声笑7

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

网上有很多有关重叠延伸PCR的，你可以百度都有关于引物设计的。一般重叠10bp左右就可以。我做的是重叠12-15bp
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9楼2012-10-22 14:48:49
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sarah-miao

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol，里面很详细。

你做过的没，实验顺利么？
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10楼2012-11-29 10:50:14
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