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明月无心

铜虫 (初入文坛)

[求助] 本人最近在做定点突变相关内容,求部分重叠引物设计方法

本人最近在做定点突变相关内容,求部分重叠引物设计方法?谢谢各位大侠!Sample Text
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ypan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol,里面很详细。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-10-15 17:45:25
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ypan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-16 17:08:55
引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol,里面很详细。

stratagene公司的点突变还是非常有名的。
3楼2012-10-15 17:45:51
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-10-16 17:09:08
对的,赞成楼上的,建议你去买stratagene mutagenesis,他们家有单点和多点突变的试剂盒,操作很简单,而且引物设计也不麻烦,就是你想要的目的片段的正确序列就行。
4楼2012-10-15 21:17:09
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明月无心

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol,里面很详细。

谢谢了
5楼2012-10-16 11:11:22
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明月无心

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 水寒冰006 at 2012-10-15 21:17:09
对的,赞成楼上的,建议你去买stratagene mutagenesis,他们家有单点和多点突变的试剂盒,操作很简单,而且引物设计也不麻烦,就是你想要的目的片段的正确序列就行。

谢了
6楼2012-10-16 11:20:41
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bio-research

金虫 (职业作家)


1949stone: 金币+1, 感谢关注- 2012-10-16 17:09:29
重叠PCR设计有没有一些原则?
比如重叠部分为多个对碱基为宜?与模板配对部分又多少对为宜?我看到有些论文设计的引物与模板重叠才8对碱基?可行吗?
家有小子初长成!(Nothing is impossible to a willing heart!)
7楼2012-10-16 12:40:35
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水寒冰006

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

印象里面stratagene的好像是要20-30个左右吧,说明书里面有写,已经n久不做了,呵呵
8楼2012-10-16 17:03:11
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沧海一声笑7

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

网上有很多有关重叠延伸PCR的,你可以百度都有关于引物设计的。一般重叠10bp左右就可以。我做的是重叠12-15bp
9楼2012-10-22 14:48:49
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sarah-miao

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ypan at 2012-10-15 17:45:25
可参考agilent公司旗下的stratagene品牌的点突变试剂盒的Protocol,里面很详细。

你做过的没,实验顺利么?
10楼2012-11-29 10:50:14
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