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PCR扩增结果
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文飞778899
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PCR扩增结果
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亲们,帮我看下这图片,没有条带,只是在加样口有少许亮带,这亮带是什么呢?谢谢~~P了好多次,酶也换了,模板也一直重提,体系也试了好几种,就是这结果,真心难过!
F3.jpg
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1楼
2014-01-03 19:51:11
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文飞778899
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5楼
:
Originally posted by
20083630zhan
at 2014-01-03 21:30:51
从你的电泳结果来看,可以得出一下结论:
1:有引物二聚体,说明你应该是没有犯低级错误
2:加样孔有亮的条带,说明可能是较大的DNA 为跑出(一般情况不会),再者就是你提取的基因组或者是质粒含有蛋白质等其他杂 ...
这组引物也是引用别人文献的,退火温度先按文献说明跑了没有,后来我把退火温度降低了还是没有。
同样的模板,我昨晚用其它引物跑了下有带,但对照也有模糊带,今天再跑看看。
嗯,模板确实是粗提液,杂质比较多。
这组引物好多文献都用过,都说是最佳引物,怎么我就跑不出来,dNTP,buffer,用来跑其它的都能扩得出来的呀。
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8楼
2014-01-04 12:09:07
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gyl121
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专业: 动物遗传学
怎么没有人回答呢?我也是这个问题,这两天做这个实验,DNA别的引物都可以扩增出条带,就这个引物不靠谱,我都累了; 所以,我觉得不是DNA模板的原因,点样孔部分出现特别亮(我的实验)我觉得DNA浓度高了,可是稀释了5,10倍结果没多大变化,所以认为是浓度不合适,希望与楼主交流下意见
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不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
2楼
2014-01-03 20:00:49
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lhf903
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性别: GG
专业: 环境微生物学
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2014-01-04 00:25:20
大部分原因可能是模板问题
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3楼
2014-01-03 20:28:00
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紫色的刺客
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虫号: 1730572
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专业: 兽医寄生虫学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2014-01-04 00:25:29
这个明显没结果,建议你先用别人报道过的基因引物做个阳性对照,如果阳性对照都没跑出来,那就是模板有问题,如果阳性对照有结果,就是你这个引物问题,建议做个温度梯度
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4楼
2014-01-03 20:54:59
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