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文飞778899

银虫 (小有名气)

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[求助] PCR扩增结果已有4人参与

亲们，帮我看下这图片，没有条带，只是在加样口有少许亮带，这亮带是什么呢？谢谢～～P了好多次，酶也换了，模板也一直重提，体系也试了好几种，就是这结果，真心难过！

F3.jpg

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1楼2014-01-03 19:51:11

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20083630zhan

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-04 00:25:42
文飞778899: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-01-04 12:00:26

从你的电泳结果来看，可以得出一下结论：
1：有引物二聚体，说明你应该是没有犯低级错误
2：加样孔有亮的条带，说明可能是较大的DNA 为跑出（一般情况不会），再者就是你提取的基因组或者是质粒含有蛋白质等其他杂志
3：泳道有很明显的弥散现象，说明你的模板里面的DNA降解非常严重，建议考虑一下你的模板的质量问题
4：退火温度太高，核对一下你的PCR程序以及Tm值
5：dNTP有问题，可以更换PCR体系中的dNTP以及buffer