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文飞778899

银虫 (小有名气)

[求助] PCR扩增结果 已有4人参与

亲们,帮我看下这图片,没有条带,只是在加样口有少许亮带,这亮带是什么呢?谢谢~~P了好多次,酶也换了,模板也一直重提,体系也试了好几种,就是这结果,真心难过!
PCR扩增结果
F3.jpg
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文飞778899

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by shiliyusly at 2014-01-03 21:55:47
可能是点样没有点好,胶没配好。
还有可能是退火温度还可以优化,可以试着温度多降低几度。

谢谢,嗯,我跑个梯度看看
7楼2014-01-04 11:59:56
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查看全部 12 个回答

gyl121

新虫 (正式写手)

怎么没有人回答呢?我也是这个问题,这两天做这个实验,DNA别的引物都可以扩增出条带,就这个引物不靠谱,我都累了; 所以,我觉得不是DNA模板的原因,点样孔部分出现特别亮(我的实验)我觉得DNA浓度高了,可是稀释了5,10倍结果没多大变化,所以认为是浓度不合适,希望与楼主交流下意见
不经一番寒彻骨,怎得梅花扑鼻香?为科学进步不懈努力
2楼2014-01-03 20:00:49
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-04 00:25:20
大部分原因可能是模板问题
3楼2014-01-03 20:28:00
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紫色的刺客

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-04 00:25:29
这个明显没结果,建议你先用别人报道过的基因引物做个阳性对照,如果阳性对照都没跑出来,那就是模板有问题,如果阳性对照有结果,就是你这个引物问题,建议做个温度梯度
4楼2014-01-03 20:54:59
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