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swfssss

新虫 (初入文坛)

[求助] 我要做电子克隆 已有1人参与

生物信息学的作业,要求电子克隆某个物种的某个未知基因,关键是我不知道要克隆什么基因!
我就想请问各位大侠,我该如何选择我要克隆的基因?我怎么知道我要克隆的那个基因是否已经有人克隆(报道)过了?
希望各位前辈赐教,感激不尽!
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+2, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-01-06 05:16:12
swfssss: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢楼主的热心解答 2014-01-06 18:07:07
我是个外行,对严格的电子克隆内容缺乏了解!仅就个人理解加以叙述!
对于新基因,我个人理解分为两类,以物种A、B加以区分。就单独的A物种而言,没有报道的就是新基因;同时对比A,B两个物种,同一个基因在A中有报道,但是在B中没有,那么这个基因在B中也是个新基因,也符合楼主的要求(仅仅是个人理解哈)
对于克隆克隆,我向楼主推荐一个方法,不知道是否合适,就是“同源克隆法”
比如说楼主现在的目标物种是A,楼主可以在A以外的其他物种中寻找目标基因,比如说B,或者其他模式生物,找相关途径感兴趣的基因,什么基因都可以。
验证这个基因是否在目标物种中已被研究,可以利用NCBI的BLAST,把序列粘进去,直接运行,看看是否在目标序列有高度同源的物种即可!
如果目标物种有参考全基因组序列,那么直接拿那个基因与目标物种全基因组做比对,或者比对蛋白,蛋白相似性40%以上的都可以理解为具有同源性。
如果目标物种没有参考序列,我就不知道这个电子克隆要做到什么了,通常的方式是,比对除目标物种以为的其他物种的目标基因,找基因保守序列,然后根据保守序列设计引物,用目标物种的DNA做模板扩增,可以直接拿到目标基因在目标物种中的序列!
祝楼主顺利,再坐等高手的赐教!
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
2楼2014-01-05 21:18:45
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