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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军

[交流] 【原创】刚才发现的一个做克隆时涂板的小窍门 已有15人参与

各位做生物的都是常做克隆的,克隆中也就是以限制性内切酶和连接酶,切下来又连上去。然后就是转化大肠杆菌涂板。但经常发现菌落长的满板都是,尤其是蓝白斑和电转农杆菌的时候。满板的菌落不好挑取,而且还耽误了时间。

    我刚才发现了个窍门,是涂板时,4000rpm离心3分钟完毕后,以移液器将菌体沉淀悬浮,吸取4/5的菌液滴到平板的1/2部分,剩余的1/5加至平板的另外1/2部分。涂板时,先涂菌液少的那1/2,然后再涂菌液多的1/2部分。如此以来,像是一个菌液的浓度梯度,最后在抗生素板上长出来的菌落不管多还是少,都是可以继续下一步实验的。
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人

小斑斑啊
小木虫之有关部门负责人
2楼2011-01-09 15:26:26
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shourjruo

铜虫 (小有名气)

可以尝试做做
当思考成为习惯,成功将不期而至。
3楼2011-01-09 15:28:31
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4楼2011-01-09 16:23:26
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yabing0324

金虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
嗯,说的是啊!
希望大家都向楼主学习,多给大家交流下自己的小诀窍!
5楼2011-01-09 19:55:56
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chene

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做出经验、做出创造力来了
穷则独善其身,达则兼济天下。
6楼2011-01-09 20:15:55
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+3):科研就是要有思想 2011-01-10 08:58:10
楼主涂板多的半边为多少微升?少的半边为多少微升?涂板要涂多久才干?平板直径是否9厘米?平板是否容易干?

我做的时候是涂3块,50、100、200微升各一块,直径9厘米的平板,绝对有单菌落。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2011-01-09 20:21:59
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602059625

金虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
谢谢分享
麻烦,根据经验随便涂一点就是了
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
8楼2011-01-09 20:27:36
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
呵呵,

很好的小技巧,

可以试试
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
9楼2011-01-09 21:47:21
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
原来那个实验室的时候,老板逼着我们用无菌玻璃珠晃。

现在这个实验室我学到了新招,平板都是放在4度好久的,失水了。根本不用涂布,直接吸取200ul在上面,然后注视着中心的液滴,旋转使其扩大,OK。不到扩大到平板大小的时候已经快干了。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2011-01-09 21:53:26
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