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菜菜0929木虫 (小有名气)
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求助转录组测序完成后，后续荧光定量、基因克隆引物设计问题 已有1人参与
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我们课题组最近做了转录组测序，然后找到差异基因，这些基因都给出拼接出来的序列，我要克隆某些基因。 1、我是需要3‘、5’、再全长这样的顺序来克隆还是直接设计一个全长引物直接克隆出来？ 2、我要怎样利用这样一条拼接出来的大概1000Kb的序列进行PCR引物设计和荧光定量PCR引物设计呢？是要直接拿这条已给出的拼接出来的序列在primer5上直接设计呢？还是要先去NCBI上比对出相似序列，再比较着用DNAman什么的设计？ 求高人指点 |
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