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高照李

木虫 (正式写手)

[求助] DNA测序是单向测序、和测通的区别。

我在takara测片段,对方要求填表。请问测通和单向测序有什么区别?测通的结果和双测那个质量好?
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小虫子666

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 很详细 2013-04-08 22:08:55
amisking: 回帖置顶 2013-04-14 20:59:30
单向测序:如果你的片段800bp以内,单向测序就OK了。
测通:单向测序800bp以内的也叫测通。
800bp以上的片段一般都是双向测序,速度快。
对于长片段,单向测序时间就慢了,测一段就要设计引物
例如:3000bp片段,双向测序:只需中间设计合成一次引物
而单向测序大概需合成3次引物来测序。 总之,一般测序一个反应测800bp,自己根据片段大小选择合适的测序方式就好了
2楼2013-04-08 16:38:37
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
高照李: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-09 12:41:35
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-09 13:09:29
高照李: 回帖置顶 2014-09-24 20:19:08
引用回帖:
3楼: Originally posted by 高照李 at 2013-04-08 17:50:42
非常感谢,我的片段是小于700bp,单向测通和双测比哪个好呢?
要做系统发育分析。
还有一个问题麻烦您:我以前做的一个昆虫的mtDNA片段,单向测通,峰图显示开头30bp部分不太好,但与genbank上的已有的同种片段比 ...

不同公司测一个反应测到的长度不同
不过都大于800bp,你用自己的引物测一个反应就可以了
一般一个反应开始与结尾测得不是很准...有不同一般我都是忽略的
希望帮你
4楼2013-04-08 21:50:34
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普通回帖

高照李

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小虫子666 at 2013-04-08 16:38:37
单向测序:如果你的片段800bp以内,单向测序就OK了。
测通:单向测序800bp以内的也叫测通。
800bp以上的片段一般都是双向测序,速度快。
对于长片段,单向测序时间就慢了,测一段就要设计引物
例如:3000bp片段 ...

非常感谢,我的片段是小于700bp,单向测通和双测比哪个好呢?
要做系统发育分析。
还有一个问题麻烦您:我以前做的一个昆虫的mtDNA片段,单向测通,峰图显示开头30bp部分不太好,但与genbank上的已有的同种片段比对显示几乎完全相同,请问我还保留这部分片段吗?
3楼2013-04-08 17:50:42
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高照李

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 84146922 at 2013-04-08 21:50:34
不同公司测一个反应测到的长度不同
不过都大于800bp,你用自己的引物测一个反应就可以了
一般一个反应开始与结尾测得不是很准...有不同一般我都是忽略的
希望帮你...

谢谢啦
5楼2013-04-09 12:42:05
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