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摩羯的心

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 232.3
散金: 41
帖子: 88
在线: 18.8小时
虫号: 1937844
注册: 2012-08-14
专业: 农业昆虫学

[求助] Touch Down PCR已有6人参与

各位亲，谁做过Touch Down PCR 啊？我用做普通PCR的体系，做普通PCR，能做出好多杂带，但是用Touch Down PCR，却一条带都没有，我用的程序是，高于TM值10的温度开始每个循环降低一度，到TM-5，最低退火温度的时候，再做20个循环，这样就相当于总共做了35个循环，最后再72度延伸10分钟，但是却一条条带都没有，哪位亲，帮忙分析一下

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1楼2013-12-24 14:13:32

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hoajie

银虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 229.5
红花: 2
帖子: 40
在线: 16.5小时
虫号: 2786708
注册: 2013-11-08
性别: GG
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-24 21:35:29

我做过touch down，不过跟你的不一样哎，不知道是不是pcr仪不一样。我们实验室的pcr仪是8列的，做touchdown时用8个样品，每一列各一个样品，从A到H，温度逐渐降低。你只要输入最大温度和最低温度，就行了。效果还好啊，高温时扩出来了，低温时有非特异性条带。

赞一下(1人)

2楼2013-12-24 18:07:12

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