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大雨中的狼

新虫 (初入文坛)

[求助] 设计实时定量荧光PCR的引物时引物长度一定要在100-200bp之间吗? 已有2人参与

设计实时定量荧光PCR的引物时引物长度一定要在100-200bp之间吗?
之前设计了400+和300的,师姐说太长了,不能用
她说太长的话在很短的变性阶段就不能完全断开了,是这样吗?
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不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

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大雨中的狼: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-21 19:03:21
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不是引物长度,是你PCR到的目的片段的长度。
一半的是在200左右比较好的
定量的退火时间是比较短的
借你一生好不好
2楼2013-12-21 00:38:52
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石头雪儿

金虫 (正式写手)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2013-12-22 13:56:38
目的基因的长度一般是要求在100-200左右,太长的话会影响到扩增效率,一般要求实时荧光PCR优化后的扩增效率在90-110%之类,这是保证你使用定量准确性进行计算的前提
3楼2013-12-21 16:32:36
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