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如何解决western blot实验漏胶问，原因何在，如何解决！已解决！ 已有5人参与
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最近有不少人问这个问题，之前我也遇到过： 网上的提议和分析都很有道理，但是大多解决不了问题！ 漏胶：主要说的都是浓缩胶漏，条带串联的一起。主要是由于浓缩胶本身加入的丙烯酰胺少，形成的胶，容易干，容易收缩，从而与胶版之间形成缝隙。 解决办法如下： 确保试剂正常，洗干净板子。配制好浓缩胶之后，定时30分钟，然后装到电泳槽中，加入电泳液，浸没梳子口部。定时30分钟，之后可以上样啦！ 就这样问题就解决了！ 谢谢各位，不信你试试！ |
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 分子生化实验经验积累 | 蛋白电泳 漏样 |
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2楼2013-12-30 10:27:41
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sstefsun0630
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好吧，你可能说得有一定的意义，还主要指的是 串样的问题。漏胶的主要原因是running gel凝结后取出来倒封胶的水或者乙醇等溶液时的操作，大家都是手拿板子正中，对板子的挤压导致的板子两侧产生缝隙。只要是减轻变形量的操作都可以减少漏胶。所以倒stacking gel时漏。如果凝结好后取胶板，上电泳槽的操作中也是手在胶板中部用力，产生了胶和板子的缝隙，可能你的方法有帮助。从源头解决的方法是从制胶器取板子，任何时候都是拿胶板最两端！最后，除了制胶过程外，上样操作过程本身产生串样是更普遍的原因。如果用上样专用的前端毛细管一样的吸头，问题很少，如果用普通的10ul 50ul吸头上样，很多时候本来想能尽量插入点样孔中点样，殊不知这样的枪头会将长短板撬开，你好好体会就知道了，稍微用点力，板子都和胶分开了，怎能不串样呢？所以，用专用吸头，或者，不要深入孔里面点样，就在孔外面点，慢点让样品缓缓沉下去。还有一个技巧就是移液器不要90度垂直加样，而是水平，这样保证枪头就算你用力也不会撬到两玻璃板。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-08-31 19:58:21
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