| 查看: 4105 | 回复: 6 | |||||
[交流]
如何解决western blot实验漏胶问，原因何在，如何解决！已解决！ 已有5人参与
|
|
最近有不少人问这个问题，之前我也遇到过： 网上的提议和分析都很有道理，但是大多解决不了问题！ 漏胶：主要说的都是浓缩胶漏，条带串联的一起。主要是由于浓缩胶本身加入的丙烯酰胺少，形成的胶，容易干，容易收缩，从而与胶版之间形成缝隙。 解决办法如下： 确保试剂正常，洗干净板子。配制好浓缩胶之后，定时30分钟，然后装到电泳槽中，加入电泳液，浸没梳子口部。定时30分钟，之后可以上样啦！ 就这样问题就解决了！ 谢谢各位，不信你试试！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 蛋白电泳 漏样 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有94人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- western blot实验求助
已经有5人回复
- Western Blot电泳时浓缩胶漏样 解决方法
已经有9人回复
- western blot实验
已经有12人回复
- Western blot试验中细胞密度如何确定？
已经有3人回复
- 请教Western blot问题
已经有9人回复
- western blot 的加养量如何确定以及调整，
已经有8人回复
- 讨论一下western blot的毒性问题
已经有8人回复
- western blot没有结果是怎么回事~~
已经有12人回复
- 询问western blot关于Bio-Rad电转仪的使用
已经有6人回复
- western blot 条带
已经有15人回复
- western blot 烧膜是什么原因
已经有6人回复
- 求助 western blot 分离胶处残留条带
已经有8人回复
- Western Blot出现问题
已经有19人回复
- western blot实验技术
已经有14人回复
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- Western Blot实验的蛋白条带都连在一起
已经有37人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 新手求助western blot
已经有22人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀
已经有10人回复
- 【求助/交流】请教Western blot出现非特异性条带的怎么解决
已经有8人回复
- 【求助/交流】western blot用奶粉封闭的原理
已经有18人回复
2楼2013-12-30 10:27:41
3楼2013-12-30 11:44:57
4楼2014-01-19 23:03:33
sstefsun0630
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1525.9
- 散金: 20
- 红花: 2
- 帖子: 225
- 在线: 201.2小时
- 虫号: 1499293
- 注册: 2011-11-19
- 性别: MM
- 专业: 微生物药物
5楼2014-06-20 16:10:26
6楼2016-08-31 10:31:48
ccqqsunshine
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 311.2
- 散金: 1656
- 红花: 6
- 帖子: 304
- 在线: 239.2小时
- 虫号: 436108
- 注册: 2007-08-25
- 专业: 果树学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
好吧，你可能说得有一定的意义，还主要指的是 串样的问题。漏胶的主要原因是running gel凝结后取出来倒封胶的水或者乙醇等溶液时的操作，大家都是手拿板子正中，对板子的挤压导致的板子两侧产生缝隙。只要是减轻变形量的操作都可以减少漏胶。所以倒stacking gel时漏。如果凝结好后取胶板，上电泳槽的操作中也是手在胶板中部用力，产生了胶和板子的缝隙，可能你的方法有帮助。从源头解决的方法是从制胶器取板子，任何时候都是拿胶板最两端！最后，除了制胶过程外，上样操作过程本身产生串样是更普遍的原因。如果用上样专用的前端毛细管一样的吸头，问题很少，如果用普通的10ul 50ul吸头上样，很多时候本来想能尽量插入点样孔中点样，殊不知这样的枪头会将长短板撬开，你好好体会就知道了，稍微用点力，板子都和胶分开了，怎能不串样呢？所以，用专用吸头，或者，不要深入孔里面点样，就在孔外面点，慢点让样品缓缓沉下去。还有一个技巧就是移液器不要90度垂直加样，而是水平，这样保证枪头就算你用力也不会撬到两玻璃板。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-08-31 19:58:21
28