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ds1986080607

新虫 (初入文坛)

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[求助] NC膜半干转膜已有2人参与

本人最近western试验很不顺利，PVDF转膜后marker和泳道都很淡，漂洗之后marker什么的都看不见了，最后显影什么也没有。目的蛋白65KD，用bio-rad半干转，15V，转膜时间60~90min都试过，估计问题还是出在转膜上，想用NC膜试试，听说NC膜容易转穿，有没有虫友用NC膜做过半干转，交流一下转膜经验啊，

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1楼 2013-12-19 15:18:26

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日子妞儿

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

15V 23分钟就差不多

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我是黑妞儿哈哈

7楼2014-11-14 14:09:02

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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半干转移不像湿法，需要滤纸、膜、胶的大小一样，否则转移效率很差。你的15v电流是多少？通常半干转移都是做稳流，根据胶的面积计算电流的。NC膜的条件与PVDF差不多，只是膜比较脆，容易破。

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