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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【急】！考马斯亮蓝的染色问题
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小墨825

新虫 (小有名气)

[求助] 【急】！考马斯亮蓝的染色问题 已有5人参与

我昨天下午跑的电泳，室温（大约10℃）染了4h,然后脱色一夜，今天一看条带很淡，maker也很淡（这次上样10微升比前天上样5微升还淡i），背景色还是有蓝色的，应该不是脱色过长的问题吧，会不会染色时间太短了（前天染了一夜），我现在可以再复染再脱色吗？？？（染色液从去年用到现在都没换过）请大家给我分析原因。急着要啊，谢谢！！！
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1楼 2013-12-17 09:14:11
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:15
小墨825: 金币+3, ★有帮助 2013-12-18 08:29:27
染色液也该换换了吧？放了这么久的，那就多染会，可以过夜染色
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-12-17 09:33:07
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:22
小墨825: 金币+10, ★有帮助, 谢谢啊，已经送样做质谱了，不知道会不会有影响 2013-12-18 08:30:35
你染色液用太久了，一般R250染个几次就不行了，一般我们还是俭省的也只是用个7-8次，你都用一年，太佩服了，还有就是染色前将胶用清水洗一下，去除表面SDS可以降低背景
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3楼2013-12-17 09:34:17
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-17 09:34:17
你染色液用太久了，一般R250染个几次就不行了，一般我们还是俭省的也只是用个7-8次，你都用一年，太佩服了，还有就是染色前将胶用清水洗一下，去除表面SDS可以降低背景

亲，我现在主要的问题是这块胶可不可以再复染再脱色，明天要寄样品去质谱，前天那块就是染了一夜效果还不错
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4楼2013-12-17 09:37:16
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小墨825

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-17 09:33:07
染色液也该换换了吧？放了这么久的，那就多染会，可以过夜染色

我有意识到这个问题，错误犯大了，那我现在已经脱色了还能再染么
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5楼2013-12-17 09:38:54
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:36
可以染色，这个没有关系，简易把背景先脱的淡一些再染，这样不会过多加深背景
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6楼2013-12-17 09:39:56
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晨萍之水

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:45
小墨825: 金币+4, ★有帮助 2013-12-18 08:31:02
可能温度太低了，我一般都是放在80℃的烘箱里30min 。
不过染色液的确改换了！！！！
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~勇敢和执着也是一种霸气~
7楼2013-12-17 10:50:40
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晨萍之水

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小墨825 at 2013-12-17 09:37:16
亲，我现在主要的问题是这块胶可不可以再复染再脱色，明天要寄样品去质谱，前天那块就是染了一夜效果还不错...

完全可以再染   我有一次胶染了3次
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~勇敢和执着也是一种霸气~
8楼2013-12-17 10:51:37
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Mornchen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-17 12:35:53
小墨825: 金币+2 2013-12-18 08:31:13
胶可以再用来染色，但是染色液最好换了，一年也太久啦。。。
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9楼2013-12-17 11:04:04
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zhuzhicheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小墨825: 金币+1, ★有帮助 2013-12-18 08:31:18
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 20:47:25
能染  不知道你用的是R-250的染色液还是G-250的  不过应该都能复染的
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10楼2013-12-17 13:52:52
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