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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 卡马斯亮蓝R250染色相关问题
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ljj0720

银虫 (正式写手)

[求助] 卡马斯亮蓝R250染色相关问题

SDS-PAGE跑胶完成后，染色，用的是卡马斯亮蓝R250，旧的考马斯亮蓝用完后，我又配的新的，还是按照以前的配方配的，乙醇150ML, 单蒸水120ML, 乙酸30ML, 考马斯亮蓝0.3g, 普通滤纸过滤。但是我用新配的染色完成后，颜色稍微浅一些，染色条件什么的都和以前一样。所以，现在实验结果很不好。刚开始以为是样品浓度低，所以后来加了一些浓度，染色脱色后，感觉还是没有以前的颜色深 ，一步一步排除实验中可能出现的问题，现在怀疑是染色液有问题，大家帮忙看一下吧，有没有遇到相似的问题。附图：第一个是用的旧的染色液，第二个是新的
卡马斯亮蓝R250染色相关问题
图片1前.png


卡马斯亮蓝R250染色相关问题-1
图片1后.png
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1楼 2013-12-09 08:26:39
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欧阳-90

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你染色时试试微波炉加热煮沸进行染色。我用的染色液很不一样，用的异丙醇250ml，乙酸100ml，蒸馏水650ml，R250 1g微波炉煮沸染色2min，结果都很好的
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2楼2013-12-09 08:33:26
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甲醇：水：乙酸：4.5:4.5:1
标准的配方，屡试不爽，不用过滤的
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星陈代谢
3楼2013-12-09 08:34:49
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ljj0720

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欧阳-90 at 2013-12-09 08:33:26
你染色时试试微波炉加热煮沸进行染色。我用的染色液很不一样，用的异丙醇250ml，乙酸100ml，蒸馏水650ml，R250 1g微波炉煮沸染色2min，结果都很好的

你自己配过染色液吗？是这个配方吗？
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4楼2013-12-09 08:53:53
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ljj0720

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kx444555 at 2013-12-09 08:34:49
甲醇：水：乙酸：4.5:4.5:1
标准的配方，屡试不爽，不用过滤的

甲醇味大，所以用乙醇
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5楼2013-12-09 08:56:48
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欧阳-90

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ljj0720 at 2013-12-09 08:53:53
你自己配过染色液吗？是这个配方吗？...

是的，我现在一直都在用这个方法的染色液
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6楼2013-12-09 09:42:46
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xiaopingzi22

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ljj0720 at 2013-12-09 08:56:48
甲醇味大，所以用乙醇...

恩，我们用的也是乙醇
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ljj0720
7楼2013-12-11 12:04:05
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ljj0720

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaopingzi22 at 2013-12-11 12:04:05
恩，我们用的也是乙醇...

8楼2013-12-11 21:03:21
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rice1007

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
9楼2013-12-12 10:46:46
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baobingzhiwu

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 欧阳-90 at 2013-12-09 08:33:26
你染色时试试微波炉加热煮沸进行染色。我用的染色液很不一样，用的异丙醇250ml，乙酸100ml，蒸馏水650ml，R250 1g微波炉煮沸染色2min，结果都很好的

请问你煮沸染色2min后直接脱色的吗？要脱多久？
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10楼2015-04-21 15:44:09
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